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La conservazione del materiale seminale

Metodi di conservazione:

refrigerazione 
a +4°C, il materiale deve essere utilizzato entro alcuni giorni (non più di 48h).

congelamento
in azoto liquido, il materiale può essere conservato per un tempo indefinito.

Il materiale seminale viene diluito (usiamo glicerolo, tuorlo d'uovo, latte).
Perché?
- per tamponare il pH;
- per fornire una fonte energetica;
- per prevenire la crescita batterica;
- per diminuire i danni da raffreddamento (es. sulla membrana).

Refrigerazione
bisogna diluire 1:2 o 1:3 la seconda frazione. La prima e la terza frazione riducono la qualità del seme e possono essere spermotossiche. 
Il tuorlo d'uovo migliora la longevità del seme. Ci sono diversi diluitori.

Congelamento
Non è un metodo frequente e la qualità è ridotta.
Ci sono problemi dopo scongelamento e con la fecondazione. 
Ancora non c'è una vera legislazione.

Normalmente, si preleva il materiale seminale e questo viene valutato per quanto concerne la concentrazione e la motilità. 
I diluitori utilizzati sono simili a quelli per la refrigerazione, ma contengono anche il glicerolo. È possibile utilizzare anche diluitori per equini a base di latte o diluitori specifici per cani. 

Come congelare?

  • centrifugare;

  • sospendere in medium privo di glicerolo, equilibrare per 1h a 5°C, diluizione in medium con glicerolo;

  • impaiettamento;

  • equilibratura a 5°c per 1h (fase di adattamento);

  • congelamento.

Come scongelare?

  • metodo rapido, 75°C per 6 secondi;

  • metodo intermedio, 37°C per 1 minuto;

  • metodo lento, 23°C per diversi minuti *

*qualità scarsa del seme

In genere, si preferisce il metodo rapido, ma la scelta dipende dal tipo di congelamento.

Dopo lo scongelamento si deve fare una valutazione del seme!

Si valuta:

  • la motilità progressiva > 50-60% (viene mantenuta?);

  • integrità acrosoma;

  • periodo di persistenza*;

  • morfologia.

*si valuta la motilità dopo 1h a 37°C, va bene se la motilità è almeno del 10%.


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