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Estrazione di
proteine solubili dal fegato
Materiale:
E' consigliato l'uso dei guanti
PROCEDIMENTO:
1) Diluire il tampone Tris - HCL 1 M pH9 per preparare 5
mL di tampone Tris - HCL 0,1 M, pH9
2) Mettere il pezzettino d fegato nell'eppendorf ed aggiungere il tampone
diluito, spezzettare il quanto più possibile.
3) Centrifugare a 1000 giri per 15 minuti.
4) Prelevare il sopranatante e congelare
La centrifuga
Il precipitato finale
Concentrazione (c) = Massa (Kg) / Volume (L)
In una diluizione da un volume iniziale (Vi) a uno finale (Vf)
la massa si troverà disciolta in un volume maggiore per cui la sua
concentrazione diminuirà da un valore iniziale (ci) a uno
finale (cf) mentre la sua massa sarà costante.
Massa = c X V
Nel volume Vi avrò che: Massa = ci X Vi
Nel Volume Vf avrò che: Massa = cf X Vf
Poiché la massa si conserva si ha che:ci X Vi =
cf X Vf
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