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Interazione
luce-materia
Misure allo spettrofotometro e realizzazione di una
curva di taratura per la misura della concentrazione proteica in una
soluzione
Materiale:
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spettrofotometro
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4 cuvette
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1 pipette pasteur
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1 propipetta
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3 pipette graduate da 1 - 5 - 10 mL
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soluzione di albumina sierica da 0,5 mg/mL in acqua
(soluzione madre)
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soluzione di Bradford
PROCEDIMENTO:
1) Contrassegnare le cuvette con "B", "1", "2"
e "4".
2) In ogni cuvetta aggiungere:
0,8 mL acqua
0,2 mL Bradford
3) Alla cuvetta 1 aggiungere 1 goccia di soluzione proteica.
4) Alla cuvetta 2 aggiungere 2 gocce di soluzione proteica.
5) Alla cuvetta 4 aggiungere 4 gocce di soluzione proteica.
6) Fare le letture allo spettrofotometro ed annotare il risultato (A595).
7) Costruire un grafico utilizzando un sistema di riferimento che abbia in
ascissa i valori del peso calcolato (microgrammi) dell'albumina presente in
soluzione e in ordinata i valori dell'assorbenza (A).
Asse X: Quantità proteica in microgrammi (sapendo che una goccia e di 25
microgrammi).
Asse Y: Lettura dell'assorbenza a 595 nm - Bianco.
Singola cuvetta
Le 4 cuvette
Cuvette contrassegnate
Spettrofotometro
Spettrofotometro aperto
Differente colorazione finale delle cuvette
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